蛋清蛋黃中13 種功能成分提取純化技術:為獲得高活性高產率溶菌酶,采用離子交換吸附與超濾結合、集成濃縮、低溫噴霧等工藝,研究了離子交換樹脂種類、用量、吸附反應時間、洗脫液濃度和洗脫時間等對溶菌酶提取效果的影響,將離子交換法制得的溶菌酶粗品用超濾法除鹽,研究了超濾除鹽過程中濃縮液體積、膜通量以及脫鹽率的關系,進一步經超濾濃縮后低溫噴霧干燥,溶菌酶得率91.6%,酶活力21500U/mg。設備簡單,處理量可調,樹脂易再生,大幅降低生產成本,條件溫和,不需酸堿,不導致蛋白質結構性質的變化,生物活性保持良好。生產場地清潔衛生,滿足GMP 生產規范,工藝先進,操作簡便。 針對蛋黃為油溶性、免疫球蛋白(IgY)水溶性特點,采用低溫水相萃取、提油,聚乙二醇沉淀、離子交換色譜結合超濾濃縮、親和色譜純化等,建立高活性高純度雞蛋IgY 分離提取方法,純度95%以上,達藥品級標準;活性保持率73.77%(國際上35%左右)。通過單甲氧基聚乙二醇(mPEG)對IgY 修飾改性,IgY 活性保持率提高到90%。工藝條件溫和,無污染,成本低,生產周期短,節能減排顯著。 蛋清5種蛋白質聯合提取純化技術:相繼研發了卵白蛋白、卵轉鐵蛋白、卵粘蛋白、卵巨球蛋白、S-卵白蛋白、卵類粘蛋白、抗生物素蛋白、核黃素結合蛋白、卵黃高磷蛋白等分離純化方法。以單功能成分分離純化為基礎,攻克了雞蛋清5 種功能蛋白質聯合提取共純化技術與模式。本項目首先采用聚乙二醇將將蛋清分為四個組分,使卵粘蛋白、大部分的卵白蛋白與其他蛋清蛋白質分離開來,以提高后續層析分離的選擇性;然后從蛋清組分一中純化出卵粘蛋白,溶菌酶、卵白蛋白、卵轉鐵蛋白和卵黃素蛋白4 種蛋白質,通過Q Sepharose FF陰離子交換層析將4 種蛋白質分別純化,實現了雞蛋清中5 種功能蛋白質的聯合純化。 依托該技術已開發生產溶菌酶系列產品(粉狀、噴霧劑、漱口水)、卵粘蛋白抗病毒制劑、蛋白補鐵劑等系列產品,其中,卵轉鐵蛋白補鐵劑使我國補鐵食品由無機鐵型、有機鐵型、卟啉鐵型發展到蛋白鐵時代。
展開通過禽蛋單功能成分提取純化技術及其基礎研究,突破了雞蛋中多種功能蛋白質聯合提取共純化技術。分別建立了溶菌酶、免疫球蛋白(IgY)、卵轉鐵蛋白、蛋黃卵磷脂(得到PC含16種分子結構)、卵白蛋白、卵粘蛋白、卵巨球蛋白、S-卵白蛋白、卵類粘蛋白、抗生物素蛋白、核黃素結合蛋白、卵黃高磷蛋白等13種單功能成分分離純化方法。研究揭示了相應功能成分純化方法、分子結構、功能活性的“構-效”“量-效”分子機制等基礎內容。
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展開該成果授權發明專利4項,其中國家發明專利3項,美國專利1項(專利號:US 8574883B2、ZL 201210083362.2、ZL 201310073453.2、ZL 201410154251.5)。
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